灵芝多糖提取实验具体步骤(灵芝多糖提取实验流程详解)

灵芝多糖提取实验具体步骤

灵芝多糖是灵芝中具生物活性的组成部分之一，有很多保健功效。因此，灵芝多糖的提取成为了当前研究的热点之一。下面将详细介绍灵芝多糖提取的实验流程。

实验仪器和试剂

- 实验仪器：高压灭菌锅、常温离心机、大分子有机膜（约7kDa分子量截止）、差示扫描量热仪

- 试剂：灵芝果体粉、浓乙醇、浓NaOH、浓HCl、无菌去离子水、萃取溶液（50mmol/L Tris-HCl，30mmol/L MgCl2，1.5mmol/L CaCl2，pH7.5）

实验步骤

第一步：灵芝粉的处理

将灵芝晒干，磨成粉末。因为粉末中含有大量的金属离子，会影响到灵芝多糖提取的质量，所以需要用浓NaOH浸泡3次，每次30min，再用无菌去离子水洗涤至中性，干燥备用。

第二步：制备灵芝多糖溶液

将灵芝粉加入萃取溶液中，按灵芝粉与萃取溶液的比例为1:10的比例进行搅拌静置2小时，再放入高压灭菌锅中高压灭菌，制备灵芝多糖溶液。

第三步：离心分离

将灵芝多糖溶液放入常温离心机中进行离心分离，去除固体杂质和细胞碎片。

第四步：有机膜过滤

将离心分离后的上清液，过滤到大分子有机膜（7kd）中，予以滤去大分子蛋白等底物。

第五步：浓缩

将过滤后的上清液加入差示扫描量热仪中，进行浓缩。

第六步：酸解

将浓缩后的灵芝多糖溶液用浓HCl酸解，置于烘箱中进行干燥，得到终产物——灵芝多糖。

总结

灵芝多糖提取是目前较为常见的实验操作之一，其提取的多糖具有很多生物活性，对于抗、免疫系统调节等有很好的保健作用。本实验中，多次浓NaOH浸泡与无菌去离子水洗涤是为了保证灵芝多糖提取的质量，其他步骤也很重要，所以在实验中一定要按照顺序严格操作，保证实验结果的准确性。